Identificación por espectrometría de masas MALDI-TOF
La espectrometría de masas MALDI-TOF (Desorción-ionización láser asistida por matriz – Tiempo de vuelo) es una técnica analítica de vanguardia que permite la identificación rápida, precisa y fiable de microorganismos (bacterias, levaduras, mohos) a partir de su perfil proteico. Utilizado en laboratorios de microbiología, este método se integra cada vez más en sectores industriales (farmacéutico, cosmético, alimentario, veterinario) para el control de la contaminación y la monitorización microbiológica .
¿Qué es el método MALDI-TOF?
MALDI -TOF método de espectrometría de masas basado en la desorción-ionización de una muestra mediante un láser , con la ayuda de una matriz química . Los iones así formados se separan según su tiempo de vuelo (TOF) , es decir, el tiempo que tardan en recorrer una distancia fija en un campo eléctrico.
Cada microorganismo posee una huella proteica específica , compuesta principalmente por proteínas ribosómicas . Esta huella se compara con una base de datos espectral , lo que permite una identificación fiable hasta el nivel de especie .
Cómo funciona el método MALDI-TOF
El análisis MALDI-TOF sigue estos pasos:
- Preparación de la muestra : Se deposita una colonia bacteriana en una placa objetivo, mezclada con una matriz cristalizante .
- Ionización láser : un láser UV vaporiza la matriz, liberando las proteínas de la muestra como iones.
- Medición del tiempo de vuelo (TOF) : los iones pasan a través de un tubo de vuelo; su velocidad depende de su masa . Se detectan al llegar.
- Generación del espectro de masas : el perfil obtenido (huella proteica) se compara con una base de datos para identificar el microorganismo.
Características técnicas de MALDI-TOF
- Tipo de espectrometría : MALDI-TOF. Se trata de un espectrómetro de masas que combina una fuente de ionización láser asistida por matriz (MALDI) y un analizador de tiempo de vuelo (TOF).
- Preparación rápida : unos minutos.
- Identificación de especies : basada en proteínas ribosómicas
- Matriz utilizada : ácido sinapínico o ácido α-ciano-4-hidroxicinámico (HCCA)
- Base de datos : comercial o específica (bacterias ambientales, contaminantes típicos)
- Límites de detección : unos pocos miles de células son suficientes
- de alta reproducibilidad , validable y trazable.
¿Para qué matrices?
La espectrometría de masas MALDI-TOF se aplica a colonias microbianas cultivadas o aisladas de varios tipos de muestras:
Principales aplicaciones industriales
El método MALDI-TOF se utiliza ampliamente para el diagnóstico microbiológico , pero también en la industria para aplicaciones críticas de control de calidad :
Léa Géréec
Asesor técnico y científico
