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Dosage de l’activité alkaline phosphatase (PAL, ALP)

Dosage de l’activité alkaline phosphatase (PAL, ALP)

Technique(s)
Secteur d'activité
Expertise

Physico-chimique

N° CAS

9001-78-9

Description

La phosphatase alcaline (ALP ou PAL) est une enzyme clé présente dans de nombreux tissus et milieux biologiques. Elle catalyse la déphosphorylation de diverses molécules et constitue un indicateur majeur de l’intégrité enzymatique, de la dénaturation thermique et de l’activité biologique résiduelle. Dans le domaine de l’industrie, le dosage de l’activité alkaline phosphatase, PAL, ALP est particulièrement stratégique pour évaluer la qualité de produits alimentaires, l’efficacité de procédés thermiques ou encore la stabilité enzymatique dans des formulations nutritionnelles.

Dans le secteur de la nutrition animale, l’activité PAL est utilisée pour contrôler la qualité de matières premières ou d’additifs enzymatiques, vérifier la bonne inactivation thermique d’ingrédients sensibles ou suivre la stabilité d’enzymes fonctionnelles. Pour les produits laitiers, elle est également un marqueur historique permettant de vérifier la bonne réalisation d’un traitement thermique comme la pasteurisation. Une activité résiduelle trop élevée peut indiquer soit une mauvaise maîtrise du procédé, soit une recontamination.

Méthodes analytiques pour mesurer l’activité PAL/ALP

Le choix de la méthode dépend de la matrice, du niveau de sensibilité recherché et de l’objectif industriel. Les principales techniques disponibles sont :

  • méthode colorimétrique PNPP (p-nitrophényl phosphate) pour mesurer l’activité enzymatique via la libération de p-nitrophénol, détecté spectrophotométriquement
  • ELISA pour une détection spécifique de l’enzyme, souvent utilisée dans des extraits complexes ou matrices enrichies
  • fluorimétrie pour des mesures très sensibles d’activité, particulièrement adaptée aux faibles niveaux résiduels après pasteurisation ou traitement thermique
  • spectrophotométrie UV-visible pour suivre l’évolution cinétique de la réaction enzymatique

Les conditions d’analyse (pH alcalin, température, substrat) sont rigoureusement contrôlées afin d’obtenir une mesure reproducible et représentative de l’activité enzymatique réelle.

Matrices couramment analysées

L’activité alkaline phosphatase peut être mesurée dans une grande diversité de matrices, notamment :

  • produits laitiers pasteurisés ou UHT
  • régimes alimentaires destinés aux animaux et prémix nutritionnels
  • extraits enzymatiques ou ingrédients fonctionnels
  • matrices végétales transformées
  • extraits biologiques non destinés à l’humain
  • poudres, liquides fermentés ou produits enrichis en enzymes

Selon la matrice, des étapes préalables peuvent être nécessaires : filtration, extraction, dilution, stabilisation enzymatique ou élimination d’inhibiteurs.

Applications industrielles du dosage PAL/ALP

Contrôle de pasteurisation et chauffage
La PAL est un biomarqueur historique utilisé pour vérifier la bonne réalisation des traitements thermiques. Une activité résiduelle indique un défaut de procédé ou une contamination ultérieure.

Formulations enzymatiques et additifs nutritionnels
Mesure de l’activité enzymatique réelle, contrôle de la stabilité durant le stockage, comparaison entre lots, optimisation de dose ou évaluation d’enzymes encapsulées.

Nutrition animale
Évaluation de la qualité des matières premières, contrôle des procédés thermiques appliqués aux farines, suivi de la biodisponibilité enzymatique dans les formulations destinées aux différentes espèces animales.

Recherche et développement
Suivi de la cinétique enzymatique, optimisation des procédés d’inactivation, caractérisation fonctionnelle d’ingrédients innovants.

Analyses complémentaires disponibles dans le catalogue YesWeLab

Pour une compréhension complète de la qualité enzymatique ou protéique, les analyses suivantes peuvent être pertinentes :

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