Identificación por espectrometría de masas MALDI-TOF
La espectrometría de masas MALDI-TOF (Desorción/Ionización Láser Asistida por Matriz – Tiempo de Vuelo) es una técnica analítica de vanguardia que permite la identificación rápida, precisa y fiable de microorganismos (bacterias, levaduras, mohos) a partir de su perfil proteico. Utilizado en laboratorios de microbiología, este método se está integrando cada vez más en sectores industriales (farmacéutico, cosmético, procesamiento de alimentos, salud animal) para el control de la contaminación y la monitorización microbiológica .
¿Qué es el método MALDI-TOF?
MALDI -TOF método de espectrometría de masas basado en la desorción-ionización de una muestra mediante un láser , con la ayuda de una matriz química . Los iones así formados se separan según su tiempo de vuelo (TOF) , es decir, el tiempo que tardan en recorrer una distancia fija en un campo eléctrico.
Cada microorganismo posee una huella proteica específica , compuesta principalmente por proteínas ribosómicas . Esta huella se compara con una base de datos espectral , lo que permite una identificación fiable hasta el nivel de especie .
Cómo funciona el método MALDI-TOF
El análisis MALDI-TOF sigue estos pasos:
- Preparación de la muestra : se deposita una colonia bacteriana en una placa objetivo, mezclada con una matriz cristalizante .
- Ionización láser : un láser UV vaporiza la matriz, liberando las proteínas de la muestra como iones.
- Medición del tiempo de vuelo (TOF) : los iones pasan a través de un tubo de vuelo; su velocidad depende de su masa . Se detectan al llegar.
- Generación de espectro de masas : el perfil resultante (huella proteica) se compara con una base de datos para identificar el microorganismo.
Especificaciones técnicas del MALDI-TOF
- Tipo de espectrometría : MALDI-TOF. Se trata de un espectrómetro de masas que combina una fuente de ionización láser asistida por matriz (MALDI) y un analizador de tiempo de vuelo (TOF).
- Preparación rápida : unos minutos.
- Identificación de especies : basada en proteínas ribosómicas
- Matriz utilizada : ácido sinapínico o ácido α-ciano-4-hidroxicinámico (HCCA)
- Base de datos : comercial o específica (bacterias ambientales, contaminantes típicos)
- Límites de detección : unos pocos miles de células son suficientes
- de alta reproducibilidad , validable y trazable.
¿Para qué matrices?
La espectrometría de masas MALDI-TOF es aplicable a colonias microbianas cultivadas o aisladas de diversos tipos de muestras:
Principales aplicaciones industriales
El método MALDI-TOF se utiliza ampliamente para el diagnóstico microbiológico , pero también en la industria para aplicaciones críticas de control de calidad :
Léa Géréec
Experto técnico y científico
