Prueba HET-CAM
Descripción
La prueba HET-CAM (Prueba de Huevo de Gallina en la Membrana Corioalantoidea) es un método alternativo in vitro que permite evaluar el potencial irritante ocular o cutáneo de un producto sin recurrir a ensayos con animales. Esta prueba se basa en la aplicación de la sustancia de prueba a la membrana corioalantoidea de un huevo de gallina embrionado, ricamente vascularizada, simulando así las reacciones inflamatorias de los tejidos humanos.
Recomendado en estrategias alternativas a los ensayos in vivo, el ensayo HET CAM es especialmente adecuado para productos cosméticos, detergentes, sustancias químicas o formulaciones técnicas, en fase temprana de desarrollo o para clasificación de riesgos.
Objetivos de la prueba HET-CAM
- Evaluar el potencial irritante agudo de una sustancia en tejidos sensibles
- Detectar efectos como enrojecimiento, edema, hemorragia o coagulación.
- Clasifique la sustancia según su reactividad vascular.
- Proporcionar un índice de irritación (IS) que permita una interpretación objetiva
- Cumplir con los requisitos de la normativa europea (cosméticos, REACH, CLP, etc.)
Metodología
Los huevos de gallina fecundados se incuban hasta el día 9 de embriogénesis; posteriormente, se retira la cáscara para exponer la membrana corioalantoidea. Se coloca la sustancia de prueba en la superficie y se observa la aparición de reacciones vasculares durante 5 minutos.
Los tres efectos observados son:
- Hiperemia (enrojecimiento debido a la dilatación de los capilares)
- Hemorragia (rotura de capilares)
- Coagulación (precipitación de proteínas vasculares)
un índice de irritación en función del tiempo de aparición de cada efecto, permitiendo una clasificación: no irritante, ligeramente irritante, moderadamente irritante o muy irritante.
Aplicaciones industriales
- Productos cosméticos (formulaciones primas o productos terminados)
- Materias primas químicas
- Detergentes, disolventes, mezclas industriales
- Productos de mantenimiento o limpieza
- Evaluación preliminar antes de realizar pruebas regulatorias más exhaustivas (por ejemplo, BCOP, ICE)
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