Prueba HET-CAM
Descripción
La HET-CAM (Prueba de Huevo de Gallina en la Membrana Corioalantoidea) es un método alternativo in vitro que permite evaluar el potencial irritante ocular o cutáneo de un producto sin recurrir a ensayos con animales. Esta prueba se basa en la aplicación de la sustancia en estudio a la membrana corioalantoidea de un huevo de gallina embrionado, ricamente vascularizada, simulando así las reacciones inflamatorias de los tejidos humanos.
Recomendado en estrategias de sustitución de pruebas in vivo, el ensayo HET CAM es especialmente adecuado para productos cosméticos, detergentes, sustancias químicas o formulaciones técnicas, en fases tempranas de desarrollo o para clasificación de riesgos.
Objetivos de la prueba HET-CAM
- Evaluar el potencial irritante agudo de una sustancia sobre tejidos sensibles
- Detectar efectos como enrojecimiento, hinchazón, sangrado o coagulación
- Clasifique la sustancia según su reactividad vascular
- Proporcionar un índice de irritación (IS) que permita una interpretación objetiva
- Cumplimiento de los requisitos de la normativa europea (cosméticos, REACH, CLP…)
Metodología
Los huevos de gallina fecundados se incuban hasta el noveno día de embriogénesis; posteriormente, se retira la cáscara para exponer la membrana corioalantoidea. La sustancia de prueba se deposita en la superficie y se observa la aparición de reacciones vasculares durante 5 minutos.
Los tres efectos observados son:
- Hiperemia (enrojecimiento debido a la dilatación de los capilares)
- Hemorragia (rotura de capilares)
- Coagulación (precipitación de proteínas vasculares)
un índice de irritación en función del tiempo que tarda en aparecer cada efecto, permitiendo una clasificación: no irritante, ligeramente irritante, moderadamente irritante o muy irritante.
Aplicaciones industriales
- Productos cosméticos (formulaciones primas o productos terminados)
- Materias primas químicas
- Detergentes, disolventes, mezclas industriales
- Productos de limpieza o mantenimiento
- Evaluación preliminar antes de realizar pruebas reglamentarias más exhaustivas (por ejemplo, BCOP, ICE)
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