Toxicidad aguda por inhalación – Prueba OCDE 403

La prueba OCDE 403 evalúa los efectos de la exposición aguda por inhalación a una sustancia o mezcla para determinar su riesgo inmediato para la salud humana tras una sola exposición. Realizado de acuerdo con las Directrices de la OCDE y en cumplimiento de las BPL/BPF, el estudio proporciona los datos necesarios para la clasificación y el etiquetado GHS/CLP, el registro reglamentario (REACH, biocidas, plaguicidas) y la evaluación de riesgos laborales. Permite estimar la toxicidad aguda por inhalación y orientar las medidas de prevención y gestión de riesgos.

Cuándo realizar un OCDE 403 y con qué propósito

La prueba se aplica a gases, vapores, aerosoles y polvos cuando se requieren datos de inhalación aguda para su comercialización o manipulación industrial. Determina una concentración letal media (CL50) o una categoría de riesgo agudo, identifica los órganos diana y la gravedad de los efectos, y contribuye a la clasificación SGA/CLP. Cuando es posible omitir o contrastar los datos (por ejemplo, mediante métodos alternativos o datos suficientes sobre sustancias similares), se consideran estas opciones para evitar ensayos in vivo innecesarios.

Principio del método y alcance

La prueba OECD 403 se basa en una única exposición, que suele durar cuatro horas, a diferentes concentraciones de la sustancia de prueba generadas en un sistema controlado. Dependiendo de la naturaleza del producto, la exposición se realiza solo por la nariz (preferiblemente para controlar la dosis inhalada) o en una cámara de cuerpo entero. La generación y caracterización de la atmósfera de prueba son cruciales: una concentración objetivo estable, temperatura y humedad controladas y, para aerosoles/polvos, una distribución del tamaño de partícula adecuada para la fracción respirable (MMAD típicamente 1–4 µm, GSD documentada). El estudio debe evitar cualquier condensación o adsorción que distorsione la concentración inhalada y garantizar la homogeneidad espacial.

Procedimiento experimental

Los animales (a menudo ratas adultas, preferiblemente hembras, salvo justificación contraria) se distribuyen aleatoriamente en grupos y se aclimatan. Tras una única exposición de cuatro horas a cada concentración seleccionada, se monitoriza a los animales durante al menos 14 días. Se observan signos clínicos respiratorios y neurológicos, comportamiento, peso corporal y mortalidad. Se aplican puntos de parada humanitarios para limitar el sufrimiento; cualquier animal moribundo se sacrifica, documentando con precisión la hora y los signos. Al final del estudio, se realiza una necropsia macroscópica de rutina; se pueden añadir exámenes histopatológicos específicos del tracto respiratorio o de los órganos con lesiones, según las observaciones.

Elección de concentraciones y estrategia de prueba

Un estudio preliminar puede ayudar a determinar las concentraciones objetivo. Los niveles seleccionados deben cubrir un rango relevante para establecer la relación concentración-efecto sin inducir una mortalidad excesiva. En el caso de los aerosoles, se documentan la masa generada, la estabilidad temporal y la fracción alveolar. En el caso de los vapores y gases, la presión de vapor, la formulación y la volatilidad guían el dispositivo de generación. La conformidad de las concentraciones medidas con los objetivos se verifica analíticamente durante la exposición.

Criterios de evaluación y clasificación

Se resumen los resultados individuales y grupales (signos clínicos, tiempo de inicio, reversibilidad, peso, mortalidad). Según la estrategia utilizada, se estima una CL50 o se asigna directamente una categoría aguda GHS/CLP según las respuestas observadas. El informe del estudio documenta la sustancia, el lote, la pureza, el vehículo, el método de generación, la caracterización atmosférica (concentraciones, MMAD/GSD para aerosoles), el dispositivo de exposición, las condiciones ambientales, la justificación de las concentraciones, los datos brutos, el análisis estadístico y la interpretación. En BPL, se garantiza el control de calidad, la trazabilidad, el archivo y el cumplimiento de las normas IUCLID.

Bienestar animal, renuncia y enfoques complementarios

De acuerdo con los principios de las 3R, la norma OCDE 403 busca el uso responsable de animales y el perfeccionamiento de los procedimientos (pruebas solo nasales, monitoreo estricto, puntos de parada). Antes de cualquier prueba in vivo, se realiza una revisión crítica del peso de la evidencia: datos existentes, QSAR, lecturas cruzadas, datos orales/dérmicos, información fisicoquímica y usos previstos. Se pueden considerar directrices alternativas o complementarias según el contexto regulatorio (metodologías de clasificación de toxicidad o procedimientos de concentración fija) y las opciones de exención previstas en las directrices de evaluación.

Sectores y casos de uso

Las pruebas OCDE 403 son obligatorias para sustancias y mezclas en la industria química, biocidas y productos fitosanitarios, productos intermedios y especiales, así como para materiales que puedan emitir vapores, aerosoles o polvo durante su fabricación, transporte o uso. Los resultados fundamentan la clasificación GHS/CLP, la comunicación de peligros y la definición de medidas de control de la exposición en el lugar de trabajo.

Qué apoya YesWeLab

YesWeLab selecciona un laboratorio colaborador adecuado (que cumpla con las BPL/BPL si es necesario), define la estrategia experimental con usted (método de exposición, caracterización atmosférica, niveles de concentración), coordina la planificación, supervisa el progreso a través de la plataforma y genera un informe completo que cumple con la normativa. Nuestros colaboradores cuentan con instalaciones de inhalación especializadas, recursos analíticos para la monitorización de la concentración en tiempo real y una reconocida experiencia en seguridad respiratoria.

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