Toxicidad oral aguda – Prueba OCDE 423 (Método por clase de toxicidad aguda)

La Directriz 423 de la OCDE describe un enfoque secuencial para evaluar la toxicidad oral aguda y clasificar rápidamente una sustancia según el SGA/CLP. A diferencia de los métodos tradicionales centrados en la DL50, la 423 asigna una clase de toxicidad basándose en las respuestas observadas a dosis estándar, utilizando un número reducido de animales y criterios humanitarios estrictos. Este método cuenta con amplia aceptación entre las autoridades reguladoras y está integrado en los requisitos de BPL/BPL para REACH, biocidas y expedientes de productos fitosanitarios, con un informe utilizable en IUCLID.

Objetivos y posicionamiento del método

El método OCDE 423 busca proporcionar información suficiente para la clasificación de peligros tras una única exposición oral, sin estimar un valor DL50 preciso. Es adecuado cuando el objetivo principal es la categorización eficaz de sustancias y mezclas según el SGA/CLP, la comunicación de peligros y el cumplimiento normativo. El método se utiliza prioritariamente cuando las conclusiones previsibles basadas en datos existentes, QSAR o lecturas cruzadas no permiten evitar los ensayos in vivo.

Principio metodológico y lógica secuencial

El Método 423 de la OCDE administra la sustancia de prueba por vía oral en dosis predefinidas, típicamente 5, 50, 300 y 2000 mg/kg de peso corporal. La administración se limita a un solo sexo, generalmente hembras, para minimizar la variabilidad y el número de animales necesarios. Tras cada dosis, la siguiente se determina en función de las respuestas observadas, principalmente la mortalidad y los signos clínicos. Los resultados permiten clasificar la sustancia en una clase de toxicidad aguda o continuar la investigación con la dosis inmediatamente superior o inferior. Esta lógica de toma de decisiones permite detener el estudio en cuanto se obtiene la información necesaria para la clasificación, evitando así la exposición innecesaria a dosis que podrían causar un sufrimiento significativo.

Procedimiento experimental y condiciones de prueba

Los animales son hembras adultas jóvenes, sanas, no gestantes y nulíparas, a menos que se justifique lo contrario. Se observa un período de aclimatación de al menos cinco días. Los sujetos ayunan antes de la sonda y la sustancia se administra en una dosis única a través de una sonda gástrica o una cánula endotraqueal adecuada. Los volúmenes administrados se controlan, con agua como vehículo preferido; se pueden utilizar otros vehículos si está justificado y es compatible. El estudio incluye observación minuciosa durante las primeras horas, luego diariamente durante al menos 14 días, con registro sistemático de los signos clínicos, la mortalidad y el momento de inicio y reversibilidad de los efectos. Se mide el peso corporal antes de la dosificación y luego al menos una vez por semana; se realiza una necropsia macroscópica en todos los animales, con histología dirigida cuando sea necesario.

Selección de dosis y gestión de criterios de valoración

La elección de la primera dosis se basa en los datos disponibles sobre la sustancia o sus análogos. En ausencia de información, se suele optar por una dosis intermedia para optimizar la progresión. La secuencia se ajusta en función de la mortalidad observada y la toxicidad manifiesta, aplicando criterios humanitarios para la eutanasia de animales moribundos o con sufrimiento grave. Debe evitarse la exposición a dosis corrosivas o altamente irritantes. Si se prevé baja toxicidad, se puede considerar una prueba límite de 2000 mg/kg.

Datos recopilados, interpretación y clasificación del SGA

Para cada animal, se registran las observaciones clínicas, la cronología de los efectos, la mortalidad, el peso corporal y los resultados de la necropsia. Los datos se resumen por dosis para establecer la clase de toxicidad aguda, de acuerdo con los criterios GHS/CLP. El método no pretende estimar la DL50; proporciona una categorización robusta y reproducible, suficiente para el etiquetado, la gestión de riesgos y el cumplimiento normativo. El informe del estudio incluye la identificación de la sustancia y el lote, la pureza, el vehículo, la formulación, las condiciones de alojamiento, la justificación del esquema de dosificación, las tablas de resultados, la discusión y las conclusiones. En BPL/BPL, se garantiza la garantía de calidad, la trazabilidad, el archivo y un formato conforme a IUCLID.

Diferencias clave con la OCDE 420

Las normas OCDE 423 y 420 comparten el mismo objetivo de clasificación, pero difieren en su lógica operativa. La OCDE 423 sigue un método de clasificación de toxicidad aguda basado en la mortalidad observada en umbrales predefinidos y un estricto proceso de toma de decisiones secuencial. La OCDE 420 se basa en el método de dosis predeterminada, identificando la dosis más baja que induce toxicidad manifiesta, sin observar necesariamente la mortalidad, y luego deduciendo la categoría. En la práctica, la OCDE 423 suele preferirse cuando la mortalidad es el factor determinante más relevante para las decisiones regulatorias, mientras que la OCDE 420 es útil para limitar las muertes y centrarse en la toxicidad manifiesta. La elección entre ambas depende de los requisitos regulatorios, la ética animal y el perfil toxicológico previsto.

Mejores prácticas y principios de las 3R

De acuerdo con los principios de las 3R, la OCDE 423 debe considerarse tras una revisión crítica de la información y las alternativas disponibles. La reducción del número de animales se logra mediante un enfoque secuencial y la finalización temprana tan pronto como se pueda asignar una clase. El refinamiento se logra evitando dosis que puedan causar sufrimiento significativo, utilizando criterios humanitarios y una estrecha monitorización clínica. Cuando la evidencia permita abandonar el ensayo o repetirlo, se prefieren estas opciones.

Soporte de YesWeLab

YesWeLab gestiona sus estudios OCDE 423 dentro de una red de laboratorios asociados acreditados según las normas BPL/BPM e ISO 17025. Trabajamos con usted para definir la estrategia secuencial, el nivel de evaluación inicial, el vehículo y el plan de observación, y posteriormente monitorizamos los resultados a través de nuestra plataforma digital. Recibirá un informe completo, conforme a IUCLID, inmediatamente utilizable para REACH/CLP, biocidas o productos fitosanitarios, con archivo de calidad y trazabilidad.

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