Absorción cutánea – OCDE 428

La prueba de absorción cutánea, según la directriz 428 de la OCDE, es un método in vitro reconocido internacionalmente para evaluar la cantidad de una sustancia que atraviesa la barrera cutánea humana. Esta prueba estandarizada es esencial para determinar la posible exposición sistémica relacionada con el uso de productos cosméticos, fitosanitarios, químicos o biocidas. Los resultados obtenidos se utilizan en expedientes regulatorios (cosméticos, REACH, biocidas), evaluaciones de seguridad y estudios de seguridad de ingredientes.

Objetivos de la prueba OECD 428
: La prueba nos permite:
• cuantificar la penetración transdérmica de una sustancia aplicada a la piel
• medir su presencia en el fluido receptor a lo largo del tiempo
• estudiar la distribución cutánea: superficie, estrato córneo, epidermis, dermis, fluido receptor
• evaluar la cinética de absorción y el flujo transdérmico
• determinar la fracción no absorbida o retenida en las capas cutáneas
• documentar los parámetros necesarios para las evaluaciones de riesgo (DIP, MoS, exposición sistémica)

Esta es la prueba más utilizada para completar un expediente reglamentario cuando una evaluación toxicológica requiere datos experimentales sobre la penetración cutánea.

Principio del método OECD 428:
El método utiliza celdas de difusión de Franz o de flujo continuo. Una muestra de piel extirpada (preferiblemente humana, o porcina como alternativa) separa:
• una cámara donante que contiene la formulación que se está probando
• una cámara receptora llena de un fluido receptor adaptado a la solubilidad de la sustancia.

La prueba generalmente incluye:
• preparación y verificación de la integridad de la piel (pérdida de agua transepidérmica, resistencia eléctrica)
• aplicación de la sustancia o formulación a probar
• exposición durante un tiempo definido (generalmente 24 h)
• recolección del fluido receptor a intervalos regulares
• extracción y cuantificación en las diferentes capas de la piel
• análisis de cualquier metabolito

El análisis se lleva a cabo mediante LC-MS/MS, GC-MS, HPLC-UV o radiactividad, dependiendo de la naturaleza de la sustancia.

Matrices analizadas:
La norma OECD 428 se aplica a una amplia variedad de productos destinados a entrar en contacto con la piel humana:
• ingredientes cosméticos (ingredientes activos, conservantes, perfumes, filtros UV, excipientes)
• formulaciones cosméticas terminadas (cremas, geles, lociones, sérums, bálsamos, aceites)
• productos químicos industriales que puedan entrar en contacto con la piel
• sustancias biocidas o fitosanitarias
• residuos técnicos o contaminantes en formulaciones complejas
• materias primas y soluciones puras o diluidas

Aplicaciones industriales y reglamentarias
: Las pruebas OECD 428 son obligatorias o altamente recomendables en los siguientes contextos:
• expedientes de ingredientes cosméticos (Informe de seguridad, Ficha de información del producto)
• expedientes REACH (registro, evaluación de la exposición)
• desarrollo de productos (seguridad y eficacia)
• validación de ingredientes naturales o sintéticos
• estimación de la biodisponibilidad cutánea
• evaluación del riesgo laboral
• evaluación de biocidas que entran en contacto con la piel humana

Proporciona parámetros esenciales como la dosis absorbida, el caudal, la absorción total y la distribución cutánea, que luego son utilizados por los toxicólogos para calcular el margen de seguridad.

Técnicas analíticas asociadas
: Dependiendo de la sustancia, las cuantificaciones se realizan mediante:
• LC-MS/MS
• GC-MS
• HPLC-UV
• centelleo (para sustancias radiomarcadas)
• métodos específicos para los metabolitos formados

Los laboratorios adaptan el fluido receptor, el método de extracción y la sensibilidad analítica según las propiedades fisicoquímicas de la molécula.

Análisis adicionales recomendados:
Para expedientes cosméticos o regulatorios, a menudo se combinan las siguientes pruebas:
• pruebas de fototoxicidad in vitro
• pruebas de citotoxicidad o irritación

Servicio YesWeLab:
En YesWeLab, colaboramos con una red de laboratorios rigurosamente seleccionados, especializados en ensayos OECD, toxicología in vitro y análisis regulatorios. La mayoría están certificados o acreditados (ISO 17025, GLP, COFRAC).
Dirigimos su solicitud al laboratorio más adecuado según la sustancia a analizar, la matriz, la sensibilidad analítica requerida, el marco regulatorio aplicable y el plazo de entrega deseado.
Nuestro equipo científico le apoya en la preparación de su estudio, la definición de parámetros experimentales, la interpretación de resultados y la garantía de la seguridad de su documentación regulatoria. Desde 2020, numerosas empresas industriales nos han confiado sus ensayos OECD a través de nuestra plataforma digital.